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土壤中的微生物 土壤是微生物的良好生境，土壤中有多种类群的微生物，它们对自然界物质的转化和循环起着极为重要的作用，对农业生产和环境保护有着不可忽视的影响。根际微生物与植物的关系特别密切，不同的土壤和植物对根际微生物产生显著影响，而不同的根际微生物由于其生理活性和代谢产物的不同，也将对土壤肥力和植物营养产生积极或消极的作用。土壤微生物不仅对土壤的肥力和土壤营养元素的转化起着重要作用，而且对于进入土壤中的农药及其他有机污染物的自净、有毒金属及其化合物在土壤环境中的迁移转化等都起着极为重要的作用。 （一）土壤是微生物的良好生境 自然界中，土壤是微生物生活最适宜的环境。土壤具有微生物进行生长繁殖和生命活动所需的各种条件。 1．营养 土壤中动植物代谢活动的分泌物以及它们的残体，为微生物提供了丰富的有机营养。土壤矿质成分中，有微生物生长必需的硫、磷、钾、铁、镁、钙等大量元素，还有硼、钼、锌、锰等微量元素。 2．水分和渗透压 土壤中含有微生物生活所需的水分，土壤渗透压适合微生物需求或能为微生物适应。 3．空气 土壤团粒间充满空气，适合需氧微生物生活；团粒内部氧化还原电位低，利于微需氧或厌氧微生物生活；渍水土壤中则以厌氧和兼性厌氧微生物为主。 4．pH 土壤中溶液pH一般在中性左右，且缓冲性较强，适合大多数微生物生长。在酸性或碱性的土壤中，亦有与之适应的微生物生长繁衍。 5．温度 土壤温度变动幅度较小，一般是10 ℃～25 ℃，适宜多种微生物生长。 （二）土壤中微生物的数量和分布 土壤中微生物的数量因土壤类型、季节、土层深度与层次等不同而异。一般地说，在土壤表面，由于日光照射及干燥等因素的影响，微生物不易生存，离地表10 cm～30 cm的土层中菌数最多，随土层加深，菌数减少。 土壤中微生物以细菌数量最多，为几百万个/克土至几亿个/克土，有各种生理类群，营养类型多属异养型，鉴别染色多为革兰氏阳性。放线菌含量为几万个/克土至几百万个/克土，但其生物量不比细菌低，因为菌丝体积较大。土壤中真菌含量为几千个/克土至几十万个/克土，而其生物量常比细菌的大。酸性土壤中真菌较多。藻类在土壤中的含量不及微生物总数的1％，生长在潮湿土壤的表层。原生动物在富含有机质的土壤中较多。 （三）土壤微生物的分离与计数 1．稀释平皿法 （1）在含100 ml无菌稀释水和玻璃珠的锥形瓶中加入土样10g，振荡10min，制成土壤悬浮液，同时另称一份土样烘干至恒重（105 ℃，8 h）置于干燥器中冷却后称重。 （2）将土壤悬浮液作10倍递减稀释至适当浓度。 （3）取最后3个稀释度，通常细菌取10-4～10-6，放线菌取10-3～10-5，霉菌取10-2～10-4。以平皿倾注法（混菌法）或平板涂布法（刮刀法）接种于合适的培养基，每个稀释度做3个～5个平行。注意所用吸管在每次吸取悬液时，应在稀释液中反复吹吸3次～5次，使悬液中微生物分布均匀，并避免因管壁吸附而造成误差。 （4）培养 混菌法待培养基冷凝后，涂布法待接种悬液被培养基吸收后，倒置于温箱适温（28 ℃～30 ℃）培养，酵母菌和细菌2d～4d，放线菌7 d～12 d，霉菌4 d～7 d。 （5）计数 经培养适当时间后，取出平皿，计数平板上出现的菌落。细菌和放线菌选取菌落数为30的平皿到300的平皿，真菌选菌落数在10的平皿到100的平皿，片状菌苔占平板表面15％以上的平皿应舍去，因为它们抑制了其他菌落的正常发育而造成误差。 （6）计算每克干土含菌数 （7）划线纯化 涂布分离长出的单菌落，须经划线纯化，再转斜面培养后保藏备用。涂布分离细菌的平板，温箱培养2d～3d后，于室温下放置3d或2d，使菌落性状表现较充分，然后挑取各单菌落的部分培养物，在预先制备好的平板上划线纯化。 (责任编辑：admin) |